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2010年生物化学辅导讲义:氨基酸的序列分析

|0·2010-08-06 09:33:08浏览0 收藏0

  多肽链中氨基酸序列分析

  a.分析纯化蛋白质的氨基酸残基组成

  (蛋白质水解为个别氨基酸,测各氨基酸的量及在蛋白质中的百分组成)

  ↓

  测定肽链头、尾的氨基酸残基

  二硝基氟苯法(DNP法)

  头端 尾端 羧肽酶A、B、C法等

  丹酰氯法

  ↓

  水解肽链,分别分析

  胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)法:水解芳香族氨基酸的羧基侧肽键

  胰蛋白酶法:水解赖氨酸、精氨酸的羧基侧肽键

  溴化脯法:水解蛋氨酸羧基侧的肽键

  ↓

  Edman降解法测定各肽段的氨基酸顺序

  (氨基末端氨基酸的游离α-氨基与异硫氰酸苯酯反应形成衍生物,用层析法鉴定氨基酸种类)

  b.通过核酸推演氨基酸序列。

 

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