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含量测定:紫外分光光度法(三点校正法)
原理:本法是在三个波长处测定吸收度,根据校正公式计算吸收度A校正值后,再计算含量,故本法亦称"三点校正法".原理如下:
①杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线,且随波长的增大,吸收度变小。
②物质对光的吸收具有加和性。
三点波长的选择法①第1点:选择维生素A的最大吸收波长(即λ1)。
②第2点和第3点:在最大吸收波长的两侧各选一点(即λ2和λ3)。
等波长差法:在λ1的左右各选一点为λ2和λ3,使λ3-λ1=λ1-λ2.维生素A醋酸酯。
等吸收法:在λ1的左右各选一点为λ2和λ3,使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1.维生素A醇。
③维生素A2和维生素A3;维生素A的氧化产物(环氧化物、维生素A醛和维生素A酸);维生素A在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇;维生素A的异构体;合成时产生的中间体。
④测定方法:第一法(使用于维生素A醋酸酯)
取维生素A醋酸酯,精密称定,加环己烷制成每1ml中含9~15单位的溶液。然后在300、316、328、340、360nm五个波长处分别测定吸收值,确定最大吸收波长(应为328nm)。计算各波长下的吸收度与328nm波长下的吸收度的比值。
计算:
a.求吸收系数,吸收系数=A/cl.b.求效价(U/g),U/g=吸收系数×19001900为维生素A醋酸酯在环己烷溶液中测定的换算因数。
3.求维生素A醋酸酯胶丸为标示量的百分含量。
标示量%=(A×D×1900×W)/(W×100×l×标示量)
1U=0.344μg维生素A醋酸酯1U=0.300μg维生素A醇4.A值的选择法第二法(适用于维生素A醇)
说明:
⑴维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程法(即代数法)推导出来的;维生素A醇的吸收度校正公式是用相似三角形法(几何法或成6/7定位法)推倒出来。
⑵在应用三点校正法时,除其中一点在最大吸收波长处测定外,其余两点均在最大吸收峰的两侧上升或下降陡部的波长处进行测定。
维生素E维生素E(消旋-α-生育酚醋酸酯)有天然片和合成品之分,天然品为右旋体(d-α);合成品为消旋体(dl-α)。
结构:维生素E为苯丙二氢吡喃醇衍生物,苯环上又一个乙酰化的酚羟基,故又称生育酚。他主要有α、β、γ、δ四种异构体,其中以α异构体的生理作用最强。
性质:
溶解性:微黄色或黄色透明的粘稠液体,易溶于乙醇、丙酮、乙醚、石油醚,不溶于水。
具有紫外吸收。
在无氧或其它氧化剂存在时,在酸性或碱性溶液中,加热可水解生成游离生育酚;在有氧或其它氧化剂存在时,则进一步氧化生成醌型化合物。在碱性条件下加热,这种氧化作用更易发生。
鉴别试验:
⑴硝酸反应:取本品约30mg,加无水乙醇10ml溶解后,加硝酸2ml,摇匀,在75℃加热约15min,溶液应显橙红色。
⑵水解后氧化反应:取本品约10mg,加醇制氢氧化钾试液2ml,煮沸5min,放冷,加水4ml与乙醚10ml,振摇、静置使分层,取乙醚液2ml,加2,2'-联吡啶的乙醇溶液(0.5→100)数滴和三氯化铁的乙醇溶液(0.2→100)数滴,应显血红色。
⑶紫外光谱法。
⑷薄层色谱法。
特殊杂质:
游离维生素E.利用游离维生素E的还原性,用硫酸铈滴定液(0.01mol/L)滴定,以二苯胺为指示剂,限量为2.15%.含量测定:
⑴气相色谱法:载气:氮气;固定相:硅酮(OV-17),涂布于经酸洗并硅烷化处理的硅藻土或高分子小球上;检测器:氢火焰离子化检测器;理论板数:按维生素E峰计算应不低于500;维生素E与内标物质的分离度应大于2.内标:正三十二烷。
⑵高效液相色谱法:C18柱;流动相为甲醇:水(49:1);紫外检测器;波长292nm.维生素B1结构:维生素B1(盐酸硫胺)是由氨基嘧啶环和噻唑环通过央甲基连接而成的季铵化合物,噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基,为两个碱性基团,可与酸成盐。
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