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将抗原和抗体溶液分别放在凝胶的对应孔中，让两者在凝胶中自由扩散，当抗原与抗体相遇在浓度比例适当处形成可见的白色沉淀线。
应用：
1)血清学诊断
2)免疫化学分析：沉淀线位置主要与抗原、抗体两者浓度比例有关，沉淀线靠近抗原空，提示抗体含量高;靠近抗体空，提示抗原含量多。分子量大扩散慢，扩散圈小，形成的沉淀线弯向分子量大的一边。如二者分子量相对，则形成直线。
3)抗体效价滴定：固定抗原浓度，稀释抗体;或抗原抗体双方做不同稀释，经自由扩散，一出现沉淀线的最高抗体稀释度为该抗体的效价。
4)分析抗原性质
5)鉴定抗原或抗体纯度：多条沉淀线不纯
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