当两性离子氨基酸（或蛋白质）溶解于水时，其正负离子都能解离，但解离程度与溶液的pH有关。当调节氨基酸（或蛋白质）溶液的pH，使氨基酸（或蛋白质）分子上的-NH3+和-COO-的解离程度完全相同时，即氨基酸（或蛋白质）所带净电荷为零，在电场中既不向阴极移动也不向阳极移动，此时氨基酸（或蛋白质）所处溶液的pH值称为该氨基酸（或蛋白质）的等电点（pI）。氨基酸的等电点（pI）是由其α-NH2和α-COOH解离常数的负对数pK1和pK2决定的。若一个氨基酸侧链R基团可以解离，则pKR应予以考虑。各种蛋白质具有特定的等电点，这与其所含氨基酸的种类和数量及其所处的环境pH有关。在溶液pH为8.1时，各种蛋白质的pI均小于溶液pH，解离成负离子，向正极移动。