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硝酸纤维素(NC)膜是临床医学检验技师考试需要了解的知识点,环球网校医学考试网搜集整理了相关内容,希望对广大复习备考的考生有所帮助。
硝酸纤维素(NC)膜:
硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,其优点是对蛋白有结合能力强,适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高;使用也很简便,不需要甲醛预处理,只须在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡;而且容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,但是纯的硝纤膜在比较脆,容易卷,不适合用于需要多次重复清洗的用途。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。另外由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时最好使用较温和的Tween20,而且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好)。常见生产公司有Schleicher&Schull;Millipore;PALLInvitrogen、GE(Amersham)、SantaCruz等。
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