2014年检验主管技师辅导：总蛋白定量测定

　　总蛋白定量测定是医学检验主管技师考试需要了解的知识点，环球网校医学考试网整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。

　　1、原理

　　磺基水杨酸为生物碱试剂，能沉淀蛋白质，但对白蛋白的沉淀能力比球蛋白强，加适量硫酸钠后，沉淀白、球蛋白的能力趋于一致，与标准蛋白浊度对比进行定量测定。

　　2、试剂

　　磺基水杨酸～硫酸钠试剂(SS～S)

　　磺基水杨酸3.0g

　　无水硫酸钠7.0g

　　蒸馏水加至100ml

　　过滤后，储存于棕色瓶中，如显色或混浊则不能用。

　　3、方法

　　(1)制备标准曲线含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀释混合人血清标准系列各0.5ml，加SS～S试剂4.5ml，充分混匀，7～15分钟后，用420nm波长比浊，以吸光度为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标，绘制标准曲线。

　　(2)样品检测取待测脑脊液标本各0.5ml于两只试管中，其中一只试

　　管加SS～S试剂4.5ml，另一试管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作为标本空白管。在与标准曲线相同的条件下比浊，所得得吸光度可从标准曲线上求得蛋白质浓度。

　　4、注意事项

　　(1)脑脊液如有多量细胞或混浊，应先离心以除去。如蛋白质浓度过高，应先行用生理盐水稀释后重新测定。

　　(2)加入SS～S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变，勤作标准曲线。

　　5、正常参考值

　　腰穿CSF蛋白含量：0.2～0.4g/L池穿CSF蛋白含量：0.1～0.25g/L

　　侧脑室穿刺CSF蛋白含量：0.05～0.15g/L

　　脑脊液蛋白质含量与年龄成正比，儿童含量较低，成人稍高，老年人又比成年人高。

　　6、临床意义

　　脑脊液蛋白质含量增高，为血脑屏障被破坏的标志。颇受临床工作者的重视。

　　蛋白质含量增高常见于下列情况：

　　(1)中枢神经系统炎症。脑部感染时，脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加，蛋白质分子容易透过，首先是白蛋白增高，随后是球蛋白和纤维蛋白增高。

　　(2)神经根病变。如急性感染性多发性神经炎(Guillain～Barre综合征)，多数病例有蛋白质增高，而细胞数正常或接近正常，即蛋白～细胞分离现象。

　　(3)椎管内梗阻。脑与蛛网膜下腔互不相通，血浆蛋白由脊髓中的静脉渗出，CSF蛋白质含量显著增高，有时高达30～50g/L，这时CSF变黄，可自行凝固。如脊髓肿瘤、转移癌、粘连性蛛网膜炎等。此外，早产儿CSF蛋白含量可达2g/L，新生儿为0.8～1.0g/L，出生两个月后逐渐降至正常水平。

　　含血的CSF蛋白质含量增高。为了鉴别原来有无蛋白质增高，可用每升红细胞700×106个约相当增加蛋白质量0.01g/L来推算，用含血CSF的蛋白质含量减去含红细胞数折算成的蛋白质含量，即为原来CSF的蛋白质含量。