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中药的显微鉴定法是利用显微技术对中药进行显微分析,以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定,利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性,和用显微化学方法,确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等,用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质。
(一)显微制片方法
显微鉴定时可根据检品的不同情况制作相应的制片,包括横切片或纵切片、表面制片、粉末制片、解离组织片、花粉粒与孢子制片、磨片制片、含粉末药材的制剂显微纸片等。
制作解离组织片时,解离液选择原则为:如样品中薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,可用氢氧化钾法;如果样品坚硬,木化组织较多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法。
(二)植物细胞壁和内含物的鉴别
1.细胞壁性质的鉴别:
①木质化细胞壁:加间苯三酚试液显红色或紫红色。
②木栓化或角质化细胞壁:加苏丹Ш显橘红色至红色。
③纤维素细胞壁:加氯化锌碘试液显蓝色或紫色。
④硅质化细胞壁:加硫酸无变化。
2.细胞内含物性质的鉴别:
①淀粉粒:加碘试液显蓝色或紫色。
②糊粉粒:加碘试液显棕色或黄棕色。加硝酸汞试液显砖红色。
③脂肪油、挥发油或树脂:加苏丹Ш试液显橘红色、红色或紫红色。
④菊糖:加10%α-萘酚乙醇溶液,再加硫酸显紫红色并很快溶解。
⑤黏液:加钌红试液显红色。
⑥草酸钙结晶:加稀醋酸不溶解,加稀盐酸溶解而无气泡发生。加硫酸逐渐溶解,析出结晶。
⑦碳酸钙结晶(钟乳体):加稀盐酸溶解,同时有气泡发生。
⑧硅质:加硫酸不溶解。
(三)显微测量
(四)显微常数测定
常见的显微常数主要有用于叶类鉴别的气孔数、气孔指数、栅表比、脉岛数和脉端数等。
(五)显微临时制片常用封藏试液
显微鉴定所用试剂包括蒸馏水、稀甘油、甘油醋酸试液及水合氯醛试液。
(六)扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用
扫描电镜已广泛应用于生物样品表面及其断面立体形貌的观察。偏光显微镜主要用于观察和分析矿物类中药的光学性质。