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临床医学检验复习资料:志贺菌属微生物检验
1、标本采集
尽可能在发病早期及在治疗前采集新鲜粪便,选择粘液脓血便,必要时可用肛拭子采集。
2、检验方法及鉴定
(1)分离培养:取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择性鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。培养18-24小时后选取可疑菌落进行下列鉴定。
(2)鉴定:
1)初步鉴定:挑选可疑菌落3-4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2-3支KIA(克氏双糖)和MIU(动力、吲哚、脲酶),经35℃18-24小时,凡符合KIA:K/A、产气-/+、H2S,MIU:动力-、吲哚、脲酶-,氧化酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。
2)最后鉴定:增加甘露醇(+/-)、蔗糖(-/+)(宋内志贺菌属迟缓阳性)、柠檬酸盐(-)、苯丙氨酸脱氨酶(-)、ONPG(β-半乳糖苷酶)及鸟氨酸脱羧酶(-)(宋内志贺菌属为阳性);用志贺菌属的诊断血清作群型鉴定。A群痢疾志贺菌,甘露醇阴性,10个血清型。B群福氏志贺菌,有6个血清型和X、Y2个变种。C群鲍氏志贺菌,15个血清群。D群宋内志贺菌,仅有一个血清型,有光滑型和粗糙型两种菌落。
3、与大肠埃希菌的鉴别
(1)无动力,不发酵乳糖,靛基质阴性,赖氨酸阴性。
(2)发酵糖产酸不产气(福氏志贺菌6型、鲍氏志贺菌13和14型、痢疾志贺菌3型除外)。
(3)分解黏液酸,在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱。
4、与类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别
可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。
伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌属因子血清凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。