2012年初级检验技士免疫检验：HLA抗体的临床意义及检测技术的研究进展

　　1 与器官移植的关系：

　　许多资料表明，HLA抗体可以导致针对移植物的免疫反应而发生超急排和加速性排斥反应，使移植失败或降低移植物存活率。在器官移植中，供受双方的HLA相容性越大，移植成功率越高。最近一项国际合作的研究结果显示，对36个移植中心的4763例器官移植患者检测HLA抗体，肾移植HLA抗体检出率是20. 9%，肝移植19. 3%，心脏移植22. 8%，肺脏移植14.2%.另一项在23个肾移植中心开展的检测HLA抗体预测移植1年内失败频率的研究中， 2278例肾移植病人中有HLA抗体的移植失败率为6. 6% ; 1778无HLA抗体的病人移植失败率为3. 3%.结果显示有HLA抗体移植病人的失败率明显高于无抗体的病人。另外HLA抗体的浓度与移植存活密切相关。M o n te iro等对124例肾移植患者随访发现，术后PRA(群体反应性抗体)> 50%的患者中85%需透析，PRA 10%的患者移植肾丧失的几率是PRA< 10%患者的3倍。国内外研究者一致认为移植前受者体内PRA水平的检测对于是否发生移植排斥反应有着显著影响 2 ，移植后受者体内PRA水平对于移植物存活率的高低，移植转归以及移植后的器官功能都有着重要作用 3 .最新资料显示HLA抗体是引起急排的始动因素，HLA-I类抗体出现后平均约634d移植失败，HLA-II类抗体出现后平均约1503d移植失败，病人体内可清楚检测到供者的特异性抗体 4 .随着检测HLA抗体方法的灵敏度的进一步提高，移植失败患者体内HLA抗体的检出率上升到95% 5 ，几乎所有的移植排斥均可检测到HLA抗体。 中 华 考 试 网

　　2 与输血的关系：

　　HLA抗原存在于所有的有核细胞，在淋巴细胞上的密度最高，幼稚红细胞和血小板都带有HLA抗原。因此在输注全血，红细胞悬液，粒细胞，血小板等血液成分时都有可能发生因HLA抗原型不同而引起的各类非溶血性输血反应，影响输血治疗的效果。尽管现在使用了白细胞滤器，全血或红细胞悬液输注的非溶血性输血反应得到有效的控制，但粒细胞和血小板的输注依然存在问题。大多数发热反应与多次输入HLA不相合的白细胞，血小板有关。有资料显示发热反应患者的微量淋巴细胞毒反应多数呈阳性，输血次数与阳性反应发生率呈平行关系。由于多次接受HLA不相合的白细胞，血小板，受血者血中产生相应的抗体，再次接受输血时，发生抗原抗体反应，激活补体，进一步引起白细胞，血小板溶解而释放热源，导致发热反应。同时由于个体间差异能激发产生同种抗体，也可引起发热反应。对于血小板输注而言，给具有HLA抗体的患者输注血小板，抗体可与输入的血小板反应，造成血小板输注无效。

　　3 与妊娠的关系：

　　妊娠妇女由于母胎HLA不合或输血免疫反应可以产生白细胞抗体，抗体随着妊娠次数的增加而相应增高。这种HLA抗体属于IgG，可以通过胎盘，使胎儿产生同种免疫性中性粒细胞减少症及同种免疫性血小板减少性紫癜。现代免疫学认为，母胎HLA相容性越大，母体就不能识别胚胎抗原，就不能产生封闭抗体，胚胎得不到封闭抗体的保护而遭排斥，即产生病理性妊娠。有资料表明HLA抗体与病理性妊娠如流产，不孕，妊高症和早产等均有一定关系 6 .胡兴等进一步证实妊高症组HLA抗体在显著低于对照组，尤其以HLA-II类抗体的下降更为显著，这说明HLA抗体，尤其是HLA-II类抗体的下降或缺乏在妊高症的发病及病情进展中有着重要的作用 7 ，国外也有类似报道

　　4 .HLA抗体的检测方法

　　1）微量淋巴细胞毒实验(CDC)：该实验是由美国洛杉矶加州大学的Pau l.T e ra sak i教授于1964年创建。主要原理是淋巴细胞具有HLA抗原，HLA抗体能结合到带有相应抗原的淋巴细胞膜上，补体可以结合并在淋巴细胞膜上使其死亡。如果淋巴细胞不带有相应的抗原，则无此作用。通过染色来观察细胞是否死亡来确定相应的抗原或抗体。该方法可迅速检测患者的HLA抗体，但需要分离细胞，抗原用量大且敏感性不高，多年来在临床广泛应用。

　　2） 酶联免疫法(EL ISA)：该实验的基本原理是将HLA抗原包被在一个孔内，将患者血清加入孔中与孔内的HLA抗原反应，通过酶作用使其显色，用荧光仪根据吸收光的不同来判断结果。这种方法无需分离细胞，敏感性也有所提高，无需专门仪器设备，同时可检出HLA-I类和HLA-II类抗体。但该方法操作繁琐，也较费时，一次只能检测一个指标，因此临床应用受到一定限制。

　　3） 流式细胞仪法(F lowCy tom e t ry)及单抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry)：这两种方法的基本原理323陕西医学杂志2005年3月第35卷第3期都是将HLA单价抗原包被在不同颜色的微磁珠表面，用被检测血清与磁珠反应，血清中HLA特异性抗体便与包被在磁珠上的抗原结合，然后再与标记PE的二抗孵育。根据荧光强弱通过流式细胞仪检测出与这些磁珠对应的HLA抗体。这两种方法在酶联免疫法的基础上使敏感性明显提高，排除其它非反应抗原的干扰，可准确确定HLA抗体的特异性。单抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry)在普通流式细胞仪基础上进一步改进，并通过分析软件的更新，对于较弱的反应抗体也能准确检出。

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