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初级检验技士考试辅导：支原体及其检验$lesson$
支原体及其检验
一、概述
(一)概念
支原体是一类无细胞壁、呈高度多形态性，能通过除菌滤器，在人工培养基上能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。
(二)分类与命名
支原体种类繁多，自然界分布广泛。分为两个属：一为支原体属，有几十个种，对人类有致病性的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖道支原体、穿通支原体等;另一为脲原体属，仅有一种，解脲脲原体，对人类有致病性。
(三)生物学性状
1、形态与结构
支原体个体微小，大小约为0.2～0.3um，可通过滤菌器，呈高度多态性，有球形、杆状、分支丝状等。革兰染色为阴性，但不易着色，故常用Giemsa染色法染成淡紫色。
无细胞壁，仅有细胞膜，是与细菌区别的主要特点。
支原体的细胞膜，有外、中、内三层，内外两层主要为蛋白质，中间层为脂质，胆固醇含量较多。凡能作用于胆固醇的物质(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。
2、培养特性
支原体大多数需要氧或兼性厌氧，通常在含95%N2、5%CO2环境中生长良好。营养要求比一般细菌高，可在含牛心浸液、马血清与酵母浸液的培养基上生长。支原体与脲酶体对最适pH要求不同，支原体最适pH7.8～8.0之间，低于7.0则死亡，但解脲脲原体最适pH6.0～6.5。
支原体的菌落特征与细菌L型菌落极相似，37℃培养3-10天可形成直径为0.2-0.5mm大小的菌落，低倍镜观察，菌落呈“荷包蛋”样，即中央部分较厚，不透明，向下长入培养基内，周边为一层薄薄的透明颗粒区。
支原体有许多特性与细菌L型相似，如多形性、可通过滤菌器、对低渗敏感、菌落呈“荷包蛋”样。两者不同点在于细菌L型在无抗生素等诱导因素作用下，易返祖为原菌，而支原体为独立的一类微生物，不出现返祖现象。
3、生化反应
常以发酵葡萄糖、水解氨基酸和尿素等生物特性不同，作为初步鉴别支原体的依据。
肺炎支原体、生殖道支原体等可分解葡萄糖产酸不产气，人型支原体等不能分解葡萄糖，但可利用氨基酸产NH3。解脲脲原体不能利用葡萄糖或精氨酸，但可利用尿素作能源，分解尿素产碱。
支原体进一步鉴别的依据：四氮唑还原能力、亚甲蓝抑制、溶解红细胞、吸附红细胞等生物学特性不同。
4、抗原成分
支原体的抗原性主要来自细胞膜，其外层蛋白质是主要的型特异性抗原，具有免疫原性。应用生长抑制试验(GIT)和代谢抑制试验(MIT)等利用针对此抗原的型特异性血清来抑制支原体培养基上生长，可鉴定支原抗原，进行血清分型。
5、抵抗力
支原体对热的抵抗力与细菌相似，有的较弱。支原体无细胞壁，对环境渗透压敏感，渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感，但对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感，但红霉素、四环素、链霉素及氯霉素等，作用于支原体核蛋白体的抗生素，可抑制或影响蛋白质合成，有杀灭支原体的作用。
(三)微生物学检验
由于支原体无固定形态，染色结果不易与标本中的组织碎片等杂物区别，故取患者标本直接镜检对各种支原体的诊断意义不大。微生物检验方法主要靠分离培养与血清学检验。