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初级检验技士辅导：炭疽芽胞杆菌微生物检验 $lesson$
微生物检验
(1)标本采集：皮肤炭疽取病灶分泌物;肺炭疽取痰液;肠炭疽取粪便或呕吐物;炭疽脑膜炎取脑脊液;各型炭疽均可采取血液。
(2)检验方法及鉴定：炭疽杆菌的检验要特别注意芽孢型的实验室感染。
1)直接镜检：将可疑材料涂片，1：1000的升汞固定5分钟，再行革兰染色和荚膜染色。镜检发现有荚膜的革兰阳性、两端平截、竹节状排列形成长链杆菌，可作初步报告。
2)分离培养：一般接种血琼脂平板，35℃培养18-24h后可观察到较大、灰白色、边缘不整齐和有轻微溶血的菌落。
3)鉴定
①串珠试验：将待检菌接种于含青霉素0.05―0.5U/ml的培养基经37℃培养6h后，炭疽杆菌可发生形态变化，显微镜下见大而均匀的圆球状菌体呈成串样排列，类炭疽杆菌及其他需氧菌无此现象。本试验鉴别意义较大。
②噬菌体裂解试验：
取用37℃、4-6h待检肉汤培养物，涂布于普通琼脂平板，将AP631炭疽噬菌体1滴，于平板中央划一直线，置37℃18h，出现噬菌斑或噬菌带者为阳性，每份标本应作2-3个同样的试验，同时滴种肉汤液作阴性对照。
③重碳酸盐生长毒力试验：
将待检菌接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的琼脂平板上，置10%CO2环境37℃24-48h，有毒株形成荚膜，菌落呈粘液型，无毒株不形成荚膜，呈粗糙型菌落。
④青霉素抑制试验：
将待检菌分别接种于青霉素5、10、100U/ml的普通琼脂平板，37℃培养24h，炭疽芽胞杆菌一般在含5U/ml的青霉素平板上仍能生长，在含10、100U/ml青霉素的平板上受到抑制而不生长。
⑤植物凝集试验：
炭疽杆菌菌体多糖是某些植物凝集素受体，用凝集素试验检测炭疽杆菌。常用的方法有荧光标记试验和酶联凝集素吸附试验。本试验可与其他类炭疽芽胞杆菌相鉴别。
5)判断标准：
革兰阳性、两端平整、竹节状成双或短链排列，有荚膜的粗大杆菌，或荚膜肿胀试验阳性，串珠试验阳性;重碳酸盐毒力试验出现粘液型菌落可作出诊断。