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初级检验技师辅导：荧光免疫自动化分析 $lesson$
荧光免疫自动化分析
(1)时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)：是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。
①分析原理：它主要使用长效荧光标记物(稀土金属Eu、Tb、Sm、Dy)，在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。
②时间分辨信号原理：普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱，在选择荧光物质作为标记物时，必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差，以防影响检测结果的准确性。
③解离增强原理：它用具有双功能基团结构的螯合剂，使其一端与铕(Eu)连接，另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接，形成EU标记的抗体/抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因此加入一种增强剂，来大大增强荧光信号。
(2)荧光偏振免疫测定(FPIA)：荧光素标记的抗原与标本中的抗原竞争结合特异性抗体，反应后用单一平面偏振的光源照射，荧光素被激发产生偏振荧光。偏振荧光强度与分子转动的速度成反比。主要用于测定小分子药物浓度。
(3)荧光酶免疫分析：是以碱性磷酸酶为标记用酶，以反应管作为固相载体，以4-甲基伞型酮磷酸盐(4-MUP)为酶反应荧光基质。根据荧光计数仪记录荧光强度来计算所测物质的浓度。可用于各种抗原抗体的检测。
(4)临床应用：可应用于多种物质的检测：例如肿瘤标志物;激素;甲状腺激素;铁蛋白;HbsAg等。FPIA主要用于药物浓度的检测及分析：如叶酸、VB12、可卡因、利多卡因等。荧光酶免疫分析主要用于过敏原检测以及特异性IgE检测。
例题：时间分辨荧光免疫分析所用的标记物是：
A.FITC B.PE C.PEcy7 D.镧系元素
答案：D