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初级检验技师辅导:化学发光自动化免疫分析 $lesson$
化学发光自动化免疫分析
(1)原理:是将发光系统与免疫反应相结合,以检测抗原或抗体的方法。其既具有免疫反应的特异性,更兼有发光反应的高敏感性。发光可分为三种类型:光照发光、生物发光和化学发光。
(2)化学发光免疫分析中的标记物质及类型
①发光免疫分析反应中直接参与发光反应的标记物;
②以催化作用或能量传递参与发光反应的酶标记物;有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(ALP)。
③以能量传递参与氧化反应的非酶标记物。最常用的有三联吡啶钌标记物。
例题:化学发光免疫分析中以催化作用参与发光反应最常用的酶标记物:
A.HRP B.THB C.TMB D.OPD E.ALP
答案:AE
(3)化学发光免疫分析的类型:
①化学发光酶免疫测定(CLEIA):是采用化学发光剂作为酶反应底物的酶标记免疫测定。以过氧化物酶为标记酶、以鲁米诺为发光底物、并加入发光增强剂以提高敏感度和发光稳定性。应用的标记酶也可以为碱性磷酸酶,固相载体为磁性微粒。
②化学发光免疫测定(CLIA):是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。吖啶酯是较为理想的发光底物。鲁米诺类和吖啶酯类发光剂等均是常用的标记发光剂。
③微粒子化学发光免疫分析:有两种方法:一是小分子抗原物质的测定采用竞争法;二是大分子的抗原物质测定采用双抗体夹心法。
④电化学发光免疫测定(ECLI):是一种在电极表面由电化学引发的特异性发光反应,包括电化学和化学发光两个部分。
(4)临床应用优越性①敏感度高,甚至超过RIA;②精密度和准确性好,可与RIA相比;③试剂稳定无毒害;④测定耗时短;⑤测定项目多;⑥已发展成自动化测定系统,因此在医学检验中可取代RIA。