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初级检验技士考试辅导：微生物学检查 $lesson$
微生物学检查
1、标本采集：根据不同疾病采集不同标本，血液、尿液、粪便及食物。肠热症的第1、2周取血液，第2、3周取粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。食物中毒采集食物与粪便。
2、检验方法及鉴定
1、直接检测：商品胶乳凝集试剂，快速检出沙门菌和志贺菌。
2、分离培养：
1)粪便：一般将粪便或肛拭直接接种于SS和麦康凯平板上，用两种培养基的目的是提高标本的阳性检出率。
2)血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5ml试管中进行增菌，48小时将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上，若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。对增菌培养物连续培养7天，仍无细菌生长时，则报告阴性。
3)尿液：取尿液2-3ml经硫磺酸盐肉汤增菌后，再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养，亦可将尿液离心沉淀物分离培养。
4)局部感染的脓液。
3、鉴定：沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同，须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。
(1)初步鉴定：如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验，阴性时，挑取可疑菌落分别接种于KIA和MIU上，并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。
凡符合KIA：K/A、产气+/-、H2S+/-、MIU：动力+、吲哚-、脲酶+、氧化酶-，触酶+，硝酸盐还原+，以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性，鉴定为沙门菌属。
(2)最后鉴定：沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清型。
(3)血清学诊断：肥达试验：用已知的伤寒沙门菌O、H抗原，副伤寒沙门菌甲、乙H抗原稀释后，与被检血清作定量凝集试验，以检测患者血清中抗体的含量，来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症，并判断沙门菌的种类。
菌体抗原(O抗原)――颗粒状凝集
鞭毛抗原(H抗原)――絮状凝集
一般伤寒O>1:80;H>1:160有临床意义;
副伤寒A、B、C>1:80有临床意义
若第二次效价比第一次高4倍以上具有诊断价值。
O抗原为IgM，出现早，持续存在时间较短。
H抗原为IgG出现较迟，持续存在时间较长。
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