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初级检验技师辅导:细胞黏附分子的测定 $lesson$
细胞黏附分子的测定技术
同学们应重点掌握:1.细胞表面黏附分子的测定: 2.可溶性黏附因子的测定: 3.了解临床应用
白细胞和血管内皮细胞、巨噬细胞和上皮细胞等以及血液中均存在细胞粘附分子。按其结构特点,分有钙离子依赖性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族四大类。
1.细胞表面粘附分子的检测
(1)放射免疫测定法:通常用抗细胞粘附分子抗体包被载体,加受检样品后,继加相应单克隆抗体和同位素标记的二抗作非竞争性固相放射免疫测定法。
(2)荧光免疫测定法:用不同激发波长的荧光素着染色受检细胞,在FACS仪上可同时检测有两种不同的细胞粘附分子。
(3)酶免疫测定法:主要为双抗体夹心ELISA,本法应用最广,但仅能检出一群细胞的表面粘附分子数量,而不能反映单个细胞粘附分子数量的变化。
(4)其他方法:如酶免疫组织化学测定、流式细胞仪分析、时间分辨荧光免疫测定等。
2.可溶性粘附分子的检测:多采用双抗体夹心ELISA,研究最多的选择素家族和免疫球蛋白超家族。前者有E、L、P三型,均可见血液中。