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初级检验技师辅导:荧光免疫组织化学技术
荧光免疫组织化学技术
(1)直接法
①检查抗原法:用已知特异性抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应抗原结合,在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异、简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差。
②检查抗体法:将抗原标记上荧光素,即为荧光抗原,用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应,而将抗体定位检测出来。
(2)间接法:①夹心法;②检查抗体法;此法是检验血清中自身抗体和多种病原体抗体的重要手段。③检查抗原法双薄片。
(3)补体法:①直接检查组织内免疫复合物法。②间接检查组织内抗原法。
(4)双标记荧光免疫法:将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用TMRITC或RB200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。
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