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初级检验技师辅导:膜载体的酶免疫测定
膜载体的酶免疫测定
(1)斑点-ELISA:特点:①以吸附蛋白质能力很强的硝酸纤维素膜为固相载体,在膜上点加样品抗原;②底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色。原理:同ELISA相似。
(2)免疫印迹法(IBT):亦称酶联免疫电转移印斑法(EITB),亦被称为Western blot。免疫印迹法分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。第二阶段为电转移。第三阶段为酶免疫定位。常用的HRP底物为3,3’-二氨基联苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈蓝紫色)。
(3)斑点免疫渗滤试验:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上,以液体渗滤过膜的方式迅速完成。
(4)斑点免疫层析试验:以硝酸纤维素为载体,利用微孔滤膜的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,犹如层析一般。
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