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初级检验技师考试辅导:免疫原的制备
免疫原的制备
(1)颗粒性抗原的制备:颗粒性抗原有各种细胞、细菌、寄生虫等。细胞抗原:一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净,配制一定浓度即可;颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法,较少作皮内注射。
(2)可溶性抗原制备
①组织和细胞粗抗原的制备:破碎方法:机械破碎法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂。可溶性抗原纯化方法:超速离心分离法、选择沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法和亲和层析法。
②免疫球蛋白片段的制备:五种免疫球蛋白分解成片段作为免疫原制备出分辨力更高的特异性抗血清。
③纯化抗原的鉴定:主要对纯化抗原的含量、理化性质、纯度及免疫活性进行鉴定。
(3)半抗原性免疫原的制备
①半抗原:某物质在独立存在时只具有反应原性而无免疫原性,这些物质称为半抗原。如分子量小于4000的有机物质。半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。
②载体的选择:蛋白质类、多肽类聚合物(常用多聚赖氨酸)、大分子聚合物和某些颗粒(聚乙烯吡咯烷酮、活性炭、羧甲基纤维素等)。
③半抗原-载体联接方法:碳二亚胺法、戊二醛法和氯甲酸异丁酯法。一般认为应连接20个以上半抗原才能使动物有效产生抗体。
(4)免疫佐剂:是指与抗原同时或预先注射于机体能增强机体免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
①佐剂种类:
具备免疫原性的佐剂:如卡介苗、枯草分枝杆菌、短小棒状杆菌、百日咳杆菌、脂多糖、细胞因子等。
不具备免疫原性的佐剂:如氢氧化铝佐剂、磷酸铝、石蜡油等。应用最多是福氏佐剂、细胞因子佐剂。
②佐剂的作用:主要作用是增强免疫原性、增加抗体的滴度和引起或增强迟发型超敏反应。
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