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检验主管技师考试辅导:比色法测定ACP
比色法测定酸性磷酸酶(ACP)
1、方法:
(1)麝香草酚酞比色法:在酸性环境下,酸性磷酸酶水解磷酸麝香草酚酞产生麝香草酚酞和无机磷。加入碱性溶液中止酶促反应,并使游离麝香草酚酞呈蓝色。在波长595nm处测定麝香草酚酞生成量,计算出ACP活性单位。(目前少用)
(2)连续监测法:α-磷酸萘胺在酸性条件下被ACP水解为α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固红盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化来计算ACP活性。前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可测得非前列腺酸性磷酸酶活性,总酸性磷酸酶活性减去非前列腺酸性磷酸酶活性得前列腺酸性磷酸酶活性。
2、生理变异:男、女性血中ACP含量无差异,新生儿ACP活性与成年人相似,出生后1个月血清酶活性甚高,然后随年龄的增长而逐渐下降,青春期又可出现活性峰值,至20岁降至成年人水平。
3、参考值:成年人总酶活性为0-9u/L,前列腺酸性磷酸酶为0-3 u/L。
4、临床意义:临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌,特别是有转移时,血清ACP可明显升高,前列腺酸性磷酸酶更有意义。溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期做过直肠检查者,此酶也可轻度增高。
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