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检验主管技师考试辅导:酶活性测定方法
酶活性测定方法
(1)按反应时间分类法:
①定时法:通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求酶反应初速度的方法,称为两点法(其中t1往往取反应开始的时间)。在酶反应一定时间后,通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等,使反应完全停止,所以也叫中止反应法。
②连续监测法:又称为动力学法或速率法、连续反应法。在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度。
③平衡法:通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法,又叫终点法。
(2)按监测方法分类:
①分光光度法;②旋光法;③荧光法;④电化学方法;⑤化学反应法;⑥核素测定法;⑦量热法。
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