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初级检验技师考试辅导:肥达氏反应操作规程
[实验原理]
本法是以伤寒"O","H";甲,乙,丙副伤寒分别培育,经甲醛处理杀死后,做成菌液供 肥达氏应用,用以伤寒的辅助诊断。
[操作方法]
1、 取康氏试管,排成5 × 7形式,5 排分别编成O,H,A,B,C; 环 球网校
2、 另取大试管一支,加入病人血清0.25ml,用4.75ml生理盐水作1:20稀释,取2.5ml该稀释血清于每排第一管内分别注入0.5ml;
3、再取2.5ml生理盐水把大试管内血清作2 倍稀释, 取2.5ml该稀释血清于每排第二管内分别注入0.5ml,以此类推 , 每排最后一管加0.5ml生理盐水作阴性对照, 各稀释度:1/20,1/40,1/80,1/160,1/320.然后于前六管中逐管加入1:10稀释的各菌液0.5ml, 各终稀释度:1/40,1/80,1/160,1/320,1/640.
4、充分振荡混匀,于37℃放置16-20小时判定结果。
[结果判定]
根据凝集反应的强弱和有无,分别以4+,3+,2+,1+,-,记录,以呈现(2+)的血清最高稀释度为终点效价。
4+:液体清澈透明,菌体全部被凝成块,沉于管底。
3+:液体较透明,大部分菌体被凝集而沉于管底。
2+:液体稍透明,管底有少量凝集沉淀物。
1+:液体较混浊,可见极少量凝集物。 环 球网校
-:液体混浊,细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点(与对照管相似)。
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