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采取病兔或死兔的空肠、回肠、盲肠内容物、肠黏膜或粪便等作被检病料。
涂片镜检：将被检材料直接涂片，作革兰氏染色镜检，可见有革兰氏阳性大杆菌，一般很少见到芽孢。
分离培养：将病料接种于熟肉培养基，置37℃温箱培养，或接种于DS培养基，亦可置37℃温箱培养。5～6小时后培养基变得很混浊，并产生大量气体。在有气体出现时(一般在4～6小时)进行传代(2～3次)可获纯培养物。或者将检验材料直接接种于鲜血琼脂平皿培养基，或葡萄糖鲜血琼脂平皿培养基，或乳糖牛奶卵黄琼脂平皿培养基，置于厌氧罐中于37℃温箱培养24小时。魏氏梭菌在鲜血琼脂或葡萄糖鲜血琼脂平皿上，形成圆形、凸起的单个菌落，大小2～4毫米，呈半透明、表面光滑、边缘整齐;有些菌株，菌落中心凹陷，表面呈放射性条纹状，边缘呈锯齿状。菌落周围出现双溶血圈。在乳糖―牛奶―卵黄琼脂平皿上，菌落周围和下面出现乳浊带。由于发酵乳糖，菌落周围呈红色晕环，但表面不形成虹彩层。最后根据典型菌落特征，挑取菌落，接种于鲜血斜面培养基，供以下各种特性检验之用。
镜检：涂片后进行革兰氏染色，镜检为革兰氏阳性、粗大杆菌，很少见有芽孢。
生化反应：将纯培养物接种于糖、醇类等生化反应培养基。魏氏梭菌能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等，靛基质阴性，硫化氢阳性。